A method for estimating the deforestation timeline in rural settlements in a scenario of malaria transmission in frontier expansion in the Amazon Region

The Malaria Frontier Hypothesis (MFH) is the current model for predicting malaria emergence in the Brazilian Amazon. It has two important dimensions, 'settlement time' and 'malaria incidence', and its prediction are: malaria incidence peaks five years after the initiation of human settlement and declines towards zero after an estimated 10 years. Although MFH is currently accepted, it has been challenged recently. Herein, we described a novel method for estimating settlement timeline by using remote sensing technology integrated in an open-software geographic information system. Surprisingly, we found that of the majority of the rural settlements with high malaria incidence are more than 10 years old.

Molecular phylogeny of the Myzorhynchella Section of Anopheles (Nyssorhynchus) (Diptera: Culicidae): genetic support for recently described and resurrected species

Phylogenetic relationships among species of the Myzorhynchella Section of Anopheles (Nyssorhynchus) were investigated using the nuclear ribosomal DNA second internal transcribed spacer (ITS2), the nuclear whitegene and mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (COI) regions. The recently described Anopheles pristinus and resurrected Anopheles guarani were also included in the study. Bayesian phylogenetic analyses found Anopheles parvus to be the most distantly related species within the Section, a finding that is consistent with morphology. An. pristinus and An. guarani were clearly resolved from Anopheles antunesi and Anopheles lutzii, respectively. An. lutzii collected in the same mountain range as the type locality were found within a strongly supported clade, whereas individuals from the southern state of Rio Grande do Sul, tentatively identified as An. lutzii based on adult female external morphology, were distinct from An. lutzii, An. antunesi and from each other, and may therefore represent two new sympatric species. A more detailed examination of An. lutzii sensu latoalong its known geographic range is recommended to resolve these anomalous relationships.

Isolation of yellow fever virus (YFV) from naturally infectied Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (diptera, cukicudae) in São Paulo State, Brazil, 2009 / Isolamento do vírus da Febre Amarela de mosquitos naturalmente infectados Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Diptera, Culicidae), São Paulo, Brasil, 2009

After detecting the death of Howlers monkeys (genus Alouatta) and isolation of yellow fever virus (YFV) in Buri county, São Paulo, Brazil, an entomological research study in the field was started. A YFV strain was isolated from newborn Swiss mice and cultured cells of Aedes albopictus - C6/36, from a pool of six Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg. leucocelaenus) mosquitoes (Dyar & Shannon) collected at the study site. Virus RNA fragment was amplified by RT-PCR and sequenced. The MCC Tree generated showed that the isolated strain is related to the South American I genotype, in a monophyletic clade containing isolates from recent 2008-2010 epidemics and epizootics in Brazil. Statistical analysis commonly used were calculated to characterize the sample in relation to diversity and dominance and indicated a pattern of dominance of one or a few species. Hg. leucocelaenus was found infected in Rio Grande do Sul State as well. In São Paulo State, this is the first detection of YFV in Hg. leucocelaenus.

Após a detecção de morte de macacos Bugios (gênero Alouatta) e isolamento do vírus da Febre Amarela (YFV) no município de Buri, Estado de São Paulo, Brasil, foi iniciada uma investigação entomológica em campo. Uma cepa de YFV foi isolada em camundongos recém-nascidos e cultura de células de Aedes albopictus - C6/36, a partir de um lote de seis mosquitos Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg leucocelaenus) Dyar & Shannon coletados no local de estudo. RNA do vírus foi amplificado por RT-PCR e seqüenciado. A topologia gerada indica que a cepa isolada está relacionada ao genótipo South American I, em clado monofilético englobando isolados recentes de epidemias e epizootias entre 2008 e 2009. Análises estatísticas geralmente usadas caracterizaram a amostra em relação à diversidade e dominância, indicando dominância relativa de uma ou poucas espécies. Hg. leucocelaenus foi detectado infectado também no Rio Grande do Sul. No Estado de São Paulo trata-se da primeira detecção do YFV em Hg leucocelaenus.

Reemergence of yellow fever: detection of transmission in the State of São Paulo, Brazil, 2008 / Reemergência de febre amarela: detecção de transmissão no Estado de São Paulo, Brasil, 2008

INTRODUCTION: Following yellow fever virus (YFV) isolation in monkeys from the São José do Rio Preto region and two fatal human autochthonous cases from the Ribeirão Preto region, State of São Paulo, Brazil, two expeditions for entomological research and eco-epidemiological evaluation were conducted. METHODS: A total of 577 samples from humans, 108 from monkeys and 3,049 mosquitoes were analyzed by one or more methods: virus isolation, ELISA-IgM, RT-PCR, histopathology and immunohistochemical. RESULTS: Of the 577 human samples, 531 were tested by ELISA-IgM, with 3 positives, and 235 were inoculated into mice and 199 in cell culture, resulting in one virus isolation. One sample was positive by histopathology and immunohistochemical. Using RT-PCR, 25 samples were processed with 4 positive reactions. A total of 108 specimens of monkeys were examined, 108 were inoculated into mice and 45 in cell culture. Four virus strains were isolated from Alouattacaraya. A total of 931 mosquitoes were captured in Sao Jose do Rio Preto and 2,118 in Ribeirão Preto and separated into batches. A single isolation of YFV was derived from a batch of 9 mosquitoes Psorophoraferox, collected in Urupês, Ribeirão Preto region. A serological survey was conducted with 128 samples from the municipalities of São Carlos, Rincão and Ribeirão Preto and 10 samples from contacts of patients from Ribeirão Preto. All samples were negative by ELISA-IgM for YFV. CONCLUSIONS: The results confirm the circulation of yellow fever, even though sporadic, in the Sao Paulo State and reinforce the importance of vaccination against yellow fever in areas considered at risk.

INTRODUÇÃO: A partir do isolamento do vírus febre amarela (VFA), de macacos, da região de São José do Rio Preto e de dois casos humanos autóctones fatais, da região de Ribeirão Preto, Estado de São Paulo, foram realizadas duas expedições para pesquisa entomológica e avaliação ecoepidemiológica. MÉTODOS: Um total de 577 amostras de humanos, 108 de macacos e 3.049 mosquitos foram analisados por um ou mais métodos: isolamento viral, ELISA-IgM, RT-PCR, histopatologia e imunohistoquímica. RESULTADOS: De 577 amostras humanas, 531 foram testadas por ELISA-IgM, sendo 3 positivas, 235 foram inoculadas em camundongos, 199 em cultura de células, obtendo-se 1 isolamento viral. Uma amostra foi positiva por histopatologia e imunohistoquímica. Por RT-PCR foram processadas 25 amostras com 4 reações positivas. Os 108 espécimes de macacos foram inoculados em camundongos, 45 em cultura de células, obtendo-se 4 isolamentos de VFA, de Alouatta caraya. Um total de 931 mosquitos foram capturados em São José do Rio Preto e 2.118 em Ribeirão Preto e separados em lotes. Um único isolamento de VFA foi derivado de um lote de 9 mosquitos Psorophora ferox, coletados em Urupês, região de Ribeirão Preto. Um inquérito sorológico foi realizado com 128 amostras dos municípios de São Carlos, Rincão e Ribeirão Preto e mais 10 amostras de contactantes de pacientes de Ribeirão Preto. Todas as amostras foram negativas por ELISA-IgM para VFA. CONCLUSÕES: Os resultados confirmam a circulação, mesmo que esporádica, do VFA no Estado de São Paulo e reforça a importância da vacinação antiamarílica nas áreas consideradas de risco.

Studies on entomological monitoring: mosquito species frequency in riverine habitats of the Igarapava Dam, Southern Region, Brazil

Avaliou-se a diversidade de mosquitos em diferentes habitats antes e depois da formação do reservatório de Igarapava no Rio Grande, Cerrado do Sudeste do Brasil, com objetivo de verificar alteração nessas populaçäes de mosquitos. Quatro habitats foram selecionados como sítios de coleta: a) peridomicílio rural, b) pastagem, c) veredas e d) mata ciliar. Realizaram-se coletas bimestrais com isca humana e armadilha de Shannon, incluindo períodos de atividade culicídea diurna, crepuscular vespertina e noturna. Os resultados do Indice de Shannon para os potenciais vetores nos diferentes habitats foram comparados pelo teste t de Student. As abundâncias sazonais de Aedes scapularis, Anopheles darlingi e Anopheles albitarsis s.l., foram descritas com a média móvel e comparadas com o teste c2. Houve alteração nas freqüências dos mosquitos nos habitats, com exceção das veredas, que estavam afastadas 13 km da área de influência do reservatório. A modificação nas abundâncias sazonais dos potenciais vetores sugere o incremento de criadouros após a formação do reservatório. Indices de diversidade são ferramentas úteis para monitorar populaçäes de mosquitos vetores em ambientes cujas mudanças drásticas podem alterar ciclos de transmissão de doenças transmitidas por vetores.

Systematic studies on Anopheles galvaoi Causey, Deane & Deane from the subgenus Nysssorhynchus blanchard (Diptera: Culicidae)

Anopheles galvaoi, a member of the subgenus Nyssorhynchus, is redescribed based on morphological characters of the adults male and female, fourth-instar larva and pupa. Female, male genitalia, larval and pupal stages are illustrated. Data about medical importance, bionomics, and distribution are given based on literature records. Adult female of An. galvaoi can be easily misidentified as An. benarrochi Gabaldón and An. aquasalis Curry. A few characters are indicated for identifying female and immatures of An. galvaoi. Phylogenetic relationships among An. galvaoi and six other species of the Oswaldoi Subgroup are estimated using COII mtDNA and ITS2 rDNA gene sequences. Lectotype of An. galvaoi, an adult female from Rio Branco, State of Acre, is invalidated

Distribuição de anofilíneos vetores pelo ecótopo humano em área de ocupação agropecuária no interior do Estado de São Paulo - Brasil / Distribution of anopheline vectors on human environment in an agricultural and ranching region of the interior of São Paulo - Brazil

Objetivos - Analisar as freqüências das distribuições peri e extradomiciliares durante o período crepuscular vespertino. Isso foi feito pela comparação da atração dos mosquitos a três métodos de coleta, os quais evidenciaram diferenças espaciais e sazonais específicas, bem como suas diferentes abundâncias no meio ambiente alterado. Métodos - A localidade escolhida para essas observações foi uma fazenda localizada próximo ao centro geográfico do estado de São Paulo, Brasil, às margens do rio Jacaré Pepira. Os mosquitos foram coletados semanalmente utilizando-se armadilha tipo Shannon no extradomicílio, e aspiração menor e isca animal no peridomicílio. Resultados - As coletas totalizaram 5.172 Anopheles distribuídos por 14 espécies pertencentes ao subgênero Nyssorhynchus. Do ponto de vista epidemiológico, Anopheles (Nys.) darlingi foi a espécie mais importante daquela área, tendo sido mais abundante no mês de março e ausente em outubro, novembro e dezembro. Anopheles (Nys.) albitarsis foi separado e designado "A" e "B", baseado apenas proporção da marcação negra do segundo tarsômero posterior. A forma B foi a forma mais abundante na área amostrada, principalmente na armadilha tipo Shannon, e a forma A foi mais abundante na coleta realizadas sobre isca animal. A distribuição sazonal de ambas as formas de An. albitarsis foi irregular. Outras espécies prevalentes na área foram Anopheles (Nys.) galvaoi e Anopheles (Nys.) strodei. Em linhas gerais, as espécies da Seção Albimanus do subgênero Nyssorhynchus foram mais abundantes durante o mês de Março. Não houve correlação significativas entre o número de mosquitos coletados, chuvas e temperatura. Conclusões - A grande variabilidade específica de Anopheles é uma evidencia de que as modificações antropogênicas resultantes da ocupação do solo por cana de açúcar e pastagens não alterou de modo irreversível o ambiente ocupado pelos anofelíneos. As variações quantitativas mensais registradas no extradomicílio foram muito semelhantes àquelas registradas no peridomicílio sobre a isca animal. A presença de animais domésticos no peridomicílio, atuou como barreira, evitando a aproximação dos Anopheles da casa habitada, reduzindo a possibilidade de contato domiciliar homem-vetor

Distribuiçäo de anofilíneos vetores pelo ecótopo humano em área de ocupaçäo agropecuária no interior do Estado de Säo Paulo - Brasil / Distribution of anopheline vectors on human environment in an agricultural and ranching region of the interior of Säo Paulo - Brazil

Objetivos - Analisar as freqüências das distribuiçöes peri e extradomiciliares durante o período crepuscular vespertino. Isso foi feito pela comparaçäo da atraçäo dos mosquitos a três métodos de coleta, os quais evidenciaram diferenças espaciais e sazonais específicas, bem como suas diferentes abundâncias no meio ambiente alterado. Métodos - A localidade escolhida para essas observaçöes foi uma fazenda localizada próximo ao centro geográfico do estado de Säo Paulo, Brasil, às margens do rio Jacaré Pepira. Os mosquitos foram coletados semanalmente utilizando-se armadilha tipo Shannon no extradomicílio, e aspiraçäo menor e isca animal no peridomicílio. Resultados - As coletas totalizaram 5.172 Anopheles distribuídos por 14 espécies pertencentes ao subgênero Nyssorhynchus. Do ponto de vista epidemiológico, Anopheles (Nys.) darlingi foi a espécie mais importante daquela área, tendo sido mais abundante no mês de março e ausente em outubro, novembro e dezembro. Anopheles (Nys.) albitarsis foi separado e designado "A" e "B", baseado apenas proporçäo da marcaçäo negra do segundo tarsômero posterior. A forma B foi a forma mais abundante na área amostrada, principalmente na armadilha tipo Shannon, e a forma A foi mais abundante na coleta realizadas sobre isca animal. A distribuiçäo sazonal de ambas as formas de An. albitarsis foi irregular. Outras espécies prevalentes na área foram Anopheles (Nys.) galvaoi e Anopheles (Nys.) strodei. Em linhas gerais, as espécies da Seçäo Albimanus do subgênero Nyssorhynchus foram mais abundantes durante o mês de Março. Näo houve correlaçäo significativas entre o número de mosquitos coletados, chuvas e temperatura. Conclusöes - A grande variabilidade específica de Anopheles é uma evidencia de que as modificaçöes antropogênicas resultantes da ocupaçäo do solo por cana de açúcar e pastagens näo alterou de modo irreversível o ambiente ocupado pelos anofelíneos. As variaçöes quantitativas mensais registradas no extradomicílio foram muito semelhantes àquelas registradas no peridomicílio sobre a isca animal. A presença de animais domésticos no peridomicílio, atuou como barreira, evitando a aproximaçäo dos Anopheles da casa habitada, reduzindo a possibilidade de contato domiciliar homem-vetor

Anofelíneos vetores em áreas de atividade agropecuária no interior no Estado de Säo Paulo, Brasil / Anopheles vectors in agricultureal and cattle-raising activities area of the inland Säo Paulo state, Brazil

Atualiza conhecimentos acerca da composiçäo específica, sazonalidade e atividade horária dos vetores de malária, em áreas sob intensa ocupaçäo agropecuária no interior do Estado de Säo Paulo. Foram feitas capturas com isca humana nos rios Jacaré Pepira, município de Dourado e Jacaré Guaçu, município de Nova Europa. Consistiu de coletas semanais, realizadas em ambiente aberto, durante o crepúsculo vespertino, que evidenciaram a presença de 11 espécies anofélicas comuns às duas áreas, sendo as mais freqüentes An. albitarsis "latu sensu", An. darlingi, An. galvaoi, An. rondoni, An. strodei e An. triannulatus. No rio Jacaré Pepira, An. darlingi mostrou maior densidade entre os meses de abril a agosto, e apresentou maior atividade antes do por do sol e atividade moderada durante o crepúsculo propriamente, com um único pico endocrepuscular. An. albitarsis mostrou, em ambas as áreas trabalhadas, aumento de densidade em funçäo do aumento da precipitaçäo pluviométrica e nítido hábito crepuscular tardio ou mesmo noturno. Discute aspectos da distribuiçäo sazonal das outras espécies prevalentes nas duas áreas, consideradas secundárias do ponto de vista epidemiológico.

Avaliaçäo do desenvolvimento larval de Anopheles darlingi criado em laboratório sob diferentes dietas / Evaluation of the larval development of Anopheles darlingi (Diptera- Culicidae) raised in the laboratory on different diets

Säo testadas três dietas para larvas de A.darlingi, buscando-se os seguintes parâmetros indicativos de desenvolviemento nesta fase: tempo de evoluçäo total e de cada estádio, diarréia sobrevivência ao estádio, diária e total. A metodologia utilizada na determinaçäo desses parâmetros constitui-se da combinaçäo de dois métodos de análise da estatística vital, adaptados ao estudo de populaçöes mantidas em laboratórios. Os tempos de evoluçäo total e de cada estádio foram determinados graficamente a partir das curvas de tendência dos estádios medianos da colônia, em inspeçöes sucessivas. Os valores de sobrevivência diária, ao estádio e total foram calculados a partir de tábuas de sobrevivência. Os resultados permitiram eleger a dieta composta de uma parte de farinha de peixe para duas partes de farinha de päo e duas partes de germe de trigo como a mais adequada ao desenvolvimento larval, com duraçäo de 12,9 dias entre o primeiro estádio e a emersäo do adulto e sobrevivência total de 95 por cento